(FUVEST) Um experimento simples realizado nas aulas de ciências do ensino básico para extração do DNA é descrito a seguir:
• Material: – 1 saco plástico tipo ziploc; – 1 morango; – 10 mL de solução de extração de DNA (preparo a seguir); – 1 filtro de papel com funil; – Álcool etílico gelado (pode ser álcool 70º g.l.); – 1 tubo de ensaio limpo; – 1 palito de madeira para manicure.
• Solução de extração de DNA (suficiente para 100 grupos): – 50 mL de detergente sem corantes; – 15 gramas de NaCl (sal de cozinha) = 2 colheres de chá; – 900 mL de água (H2O), de preferência mineral.
• Método: – Coloque um morango em um saco ziploc; – Esmague o morango com o punho por, no mínimo, 2 minutos; – Adicione a solução de extração ao conteúdo do saco; – Misture tudo, apertando com as mãos, por 1 minuto; – Derrame o extrato no aparato filtrante e deixe filtrar diretamente dentro do tubo; – Derrame devagar o álcool gelado no tubo, até que o encha até a metade; – Mergulhe o pau-de-laranjeira dentro do tubo no local onde a camada de álcool faz contato com a camada de extrato; – Mantenha o tubo ao nível dos olhos para ver o que está acontecendo.
Os componentes do protocolo que rompem a parede celular, a membrana plasmática e possibilitam a precipitação do DNA são, respectivamente,
A) maceração, detergente e álcool.
B) detergente, álcool e gravidade.
C) álcool, filtração e detergente.
D) maceração, detergente e filtração.
E) detergente, sal e álcool.
GABARITO ABAIXO:
Análises da questão:
Para compreender o experimento, é necessário relacionar cada etapa à estrutura das células vegetais e às propriedades químicas do DNA. A alternativa correta é a A, pois a maceração, o detergente e o álcool atuam, respectivamente, no rompimento dos tecidos e das estruturas celulares e na precipitação do material genético.
A) Correta. A maceração consiste em esmagar o morango, rompendo mecanicamente os tecidos e muitas paredes celulares, que são constituídas principalmente por celulose. O detergente dissolve os lipídios das membranas plasmática e nuclear, além de contribuir para a desorganização de proteínas, liberando o DNA no extrato. Por fim, o álcool geladoreduz a solubilidade do DNA na mistura aquosa, fazendo com que ele se precipite e se torne visível como filamentos esbranquiçados.
B) Incorreta. O detergente não é o principal agente responsável pelo rompimento da parede celular, e o álcool não rompe a membrana plasmática nessa etapa. A gravidade pode auxiliar a sedimentação, mas não provoca a precipitação química do DNA.
C) Incorreta. O álcool não rompe a parede celular, e a filtração serve principalmente para separar resíduos sólidos do extrato. O detergente, por sua vez, atua sobre as membranas, não sendo o agente de precipitação.
D) Incorreta. Embora a maceração contribua para romper as paredes celulares e o detergente desorganize as membranas, a filtração não precipita o DNA. Essa função cabe ao álcool.
E) Incorreta. O detergente atua principalmente sobre as membranas, enquanto o sal ajuda a neutralizar as cargas negativas dos grupos fosfato do DNA e favorece sua agregação. O álcool é o responsável por reduzir a solubilidade e permitir a precipitação.
Gabarito: A.
Qual raciocínio que a FUVEST quer que você desenvolva sobre Extração do DNA e estrutura celular?
A FUVEST espera que você interprete um procedimento experimental a partir das propriedades das estruturas biológicas e das substâncias utilizadas, em vez de apenas memorizar uma sequência de etapas.
O primeiro ponto é distinguir parede celular de membrana plasmática. Nas células vegetais, a parede celular é uma estrutura externa rígida, rica em celulose, que oferece sustentação e proteção. A membrana plasmática, localizada internamente à parede, é formada por uma bicamada lipídica com proteínas e controla a entrada e a saída de substâncias. Por isso, esmagar o morango favorece a ruptura mecânica dos tecidos e das paredes celulares, enquanto o detergente desorganiza as membranas e libera o conteúdo celular.
O segundo ponto é compreender que o DNA não fica visível simplesmente porque foi liberado. Em condições normais, ele permanece disperso no meio aquoso. A adição de álcool gelado diminui sua solubilidade, favorecendo a agregação e a precipitação. Os filamentos esbranquiçados observados na interface entre o álcool e o extrato são agrupamentos de material rico em DNA, que podem ser recolhidos com o palito.
O sal também tem uma função importante: seus íons ajudam a reduzir a repulsão entre as cargas negativas dos grupos fosfato do DNA, favorecendo sua agregação. Já a filtração remove parte dos resíduos de tecidos e outras partículas, mas não é responsável por romper membranas nem por precipitar o DNA.
Resumo final: maceração, ruptura mecânica dos tecidos e auxílio no rompimento da parede celular; detergente, desorganização das membranas lipídicas; álcool gelado, precipitação do DNA. O sal favorece a agregação, e a filtração separa resíduos sólidos.
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